-
。
本人的一些观点,很不成熟,敬请批评指正:
辐射生物剂量:此法适于照后短期内的剂量评价,中性条件优于碱性条件;
旁观效应:查阅了许多国外文献,尚无此方法观察旁观效应的研究报道,所以我采用此方法观察了1Gy照后的旁观效应,试验今天上午刚刚结束,结果待分析,粗略看,此法对于旁观效应还是很敏感的,此法的优势在于成本低,
2011年12月08日发布人:一叶
-
, 200,300, 400,500, 600,700, 800,900, 1000,11 .00ng/ml等12个级别, 培养10-14天,以最低细胞全部死亡浓度为基准,一般400-800左右,筛选时比该浓度再高一个级别,维持使用
2011年12月17日发布人:junjie05
-
。
我们在用真核表达载体如pcdna3.0或者pEGFP-c1等做稳定克隆时,常常发现,在药物筛选后期(1-2周)所形成一些耐药的克隆并没有目的基因的表达,而且这些克隆占大多数,为阳性的克隆筛选造成很大麻烦。有人认为是细胞在药物筛选过程中产生了耐药,也有人认为
2012年03月15日发布人:hot_hot_hot
-
专业是制剂,还因为制剂的人员确实很需要我们讨论相关的问题,还有我还有不少年的制药实践。在那里,我还是受到比较好的欢迎。我感谢制剂版那些曾经给我支持和鼓励的人。
楼主从事医药工作共18年,比较擅长生物制药,对化学制药,天然药物也有一定的经历和浓厚的兴趣,对下游膜分离技术及纯化技术
2013年04月26日发布人:fsdd817
-
[size=2][color=Black][b]
各位细胞高手,新年好!
救救我吧:
我的细胞经转染后,G418筛选了12天,阴性对照组全部死亡,转染组出现了几个阳性克隆,再用G418维持筛选,至今已16天,现在每瓶
2012年08月11日发布人:guagua
-
:筛选基因和目的基因共表达的质粒
转染试剂:Lipofectamine2000
操作:转染→混合板培养及检测→单克隆培养及检测
转染:主要按照Lipofectamine2000说明书进行。见其Plasmid DNA
2012年05月10日发布人:fqswdzd
-
[size=2][color=Black][b]
各位师兄师姐好,我构建了真核表达载体用脂质体转染宫颈癌细胞后,是瞬时转染的,需要用G418筛选稳定细胞株,有了抗性克隆后如何让它大量扩增呢?我筛的细胞有了克隆后死活不长了真急死人了
2012年06月28日发布人:xingyi08
-
G418,对照孔细胞全死了以后才可以将转染的细胞挑取克隆;
另外筛选的时候刚开始几天细胞死的是比较慢,后面死的就很快,要不你再过两天看看.[/color][/size],[size=2][color=Black]同意楼上的,我曾经在第9天
2012年06月24日发布人:XYZQ
-
][/font][/size],[size=2][color=Black]
不知你的细胞是否耐受基地密度培养、
10倍稀释是可以的,还可以在稀释一下;等到一定的汇合率的时候,加入筛选培养基来筛选,一段时间后,形成克隆,可以把克隆取出,在扩大培养
2012年05月15日发布人:xyw5
-
[size=2][color=Black][b]我用293细胞做转染,转染已经成功了,测过活性还可以,现在在用有限稀释法挑单克隆,但按书上的方法挑了三次都没有成功,就是将细胞稀释到10000个/ml,然后再稀释10倍,再稀释10倍,直到
2023年02月13日发布人:tianmei001